グルタルアルデヒド 0.2％ ＭｇＣｌ2 0.1Ｍ ＥＧＴＡ 2.5ｍＭ in ＰＢＳ(-) 市販のグルタルアルデヒド(25%溶液)、１Ｍ_ＭｇＣｌ２、0.1Ｍ_ＥＧＴＡを用いる場合、 グルタルアルデヒド 0.4ml ＭｇＣｌ２ 5.1ml ＥＧＴＡ 1.25ml PBS up to 50ml lacZの発色には…

原液(50mg/ml)をPBSで10倍希釈。 体重1gあたり40〜50ugを腹腔内投与。すなわち8〜10ul/g。

凍結切片作成、風乾 蒸留水(or PBS)で水洗 60%イソプロピルアルコール１分 オイルレッドO液、15分 60%イソプロピルアルコール１分 蒸留水(or PBS)で水洗 ヘマトキシリン核染色 １分 水洗、色出し 水溶性封入体で封入 オイルレッドOイソプロピルアルコール飽…

水道水・・・初期洗浄に。 脱イオン水・・・イオン交換樹脂でイオンを除いたもの。洗浄のすすぎに。 脱イオン蒸留水*1・・・イオン交換水を蒸留したもの。比抵抗値*21〜3mΩ/cm。 通常の実験には十分な精度。 純水・・・比抵抗値が高い水。〜10mΩ/cm。18mΩ/cm…

簡便、迅速で失敗が少なく、96穴の系で行える方法。PCR反応を阻害するSDSの濃度を可能な限り低く抑えてあるのがポイント。参考 1/16インチ(1.5〜2mm)のイアーパンチでサンプルを採取。 20μllysis buffer>＋2μlProteinase K*1>を加える。 55℃で15分インキュベ…

13時に血清性性腺刺激ホルモン*1を5IU、i.p. 2日後の12時に胎盤性性腺刺激ホルモン*2を5IU、i.p. 同日夕方(6〜8時)にmatingを開始し、翌日plugを確認する。 *1:セロトロピン、PMS *2:ゴナドトロピン

MitomycinC. 青紫色の結晶。日本で発見、分離された。 グラム陽性、陰性菌のみならず、ヒトの細胞にも作用するため抗腫瘍性抗生物質と呼ばれる。 DNAの架橋形成を介してDNA複製を阻害する。 水/PBSに溶解し(1mg/ml)、-20℃で保存。 冷凍すると成分が析出する…

膵臓から分泌されるプロテアーゼ(タンパク分解酵素)。 細胞をばらばらにする(disaggregate)のに用いられる。 通常、0.25%Trypsin-EDTA(0.1mM)で用いる。 反応を止めるためにトリプシンインヒビター(血清など）が必要。 トリプシンインヒビターのいらない、組…

プラスミドを加え、直ちに１秒間ボルテックス。 氷上で５分間インキュベート。 42℃で45秒間インキュベート。 直ちに１秒間ボルテックス。 全量*1をLBプレートに撒く。 *1:だいたいは全量撒いて適量、心配なら一部をstreakしておく

その１ tubeに30ulずつH2Oを入れ、爪楊枝でコロニーをつついて入れる。*1 1ulを用いてPCRを行う。35cycle。 当たりのコロニーをplateに撒くもよし、液体培地で振るもよし。 その２ まず1mlの液体培地でo/n振る。 培養液1ulを50ulのH20で希釈、1ulを用いてPCR…